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細胞簡介：

大鼠胰島分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結(jié)構(gòu)完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長的存活時間。胰島占胰腺總質(zhì)量的1%-2%，每個胰島大概含有1000個細胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴重低血糖癥狀，具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點，是有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結(jié)果鑒定等步驟，分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胰島采用膠原酶灌注消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠胰島經(jīng)DTZ染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性瘦素受體試劑盒   小鼠可溶性瘦素受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠可溶性瘦素受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性瘦素受體試劑盒、小鼠可溶性瘦素受體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒   小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠顆粒酶試劑盒   小鼠顆粒酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠顆粒酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠顆粒酶試劑盒、小鼠顆粒酶試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠抗內(nèi)膜抗體試劑盒   小鼠抗內(nèi)膜抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗內(nèi)膜抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗內(nèi)膜抗體試劑盒、小鼠抗內(nèi)膜抗體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FLRT2重組小鼠 FLRT2 蛋白 Protein

含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白 Recombinant Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)

CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein

CSK Protein Human 重組人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 標簽)

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標簽)

含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白 Recombinant Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)

CSK Protein Human 重組人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 標簽)

FLRT2重組小鼠 FLRT2 蛋白 Protein

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標簽)

CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein

大鼠胰島細胞大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)試劑盒 ，英文名： TNFβ ELISA Kit

Mouse soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒

MouseEotaxin1ELISAKit 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanImmunoglobulinE,IgEELISAKitE

微型RNA(miRNA)文庫構(gòu)建技術(shù)試劑盒5次

ELISAKitM-CSF大鼠巨噬細胞集落刺激因子

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。