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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人脂肪間充質(zhì)干細胞

英文名稱：Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells

組織來源：脂肪組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人脂肪間充質(zhì)干分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細胞，簡稱脂肪間充質(zhì)干細胞。與骨髓間充質(zhì)干細胞相比，在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質(zhì)干細胞更易獲得足夠數(shù)量的細胞，且獲取過程中對機體損傷更小，是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細胞以梭形為主要形態(tài)，BrdU可標記其細胞核。

公司實驗室分離的人脂肪間充質(zhì)干采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人脂肪間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

人粘蛋白3(MUC3)ELISA 試劑盒

Human tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)檢測試劑盒

HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人組織蛋白去乙?；?span>(HD)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAP檢測試劑盒人免疫抑制酸性蛋白(IAP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor，LIFRELISAKit人白血病抑制因子受體(LIFR)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

TNFRSF10B重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷

ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

ILKAP Protein Human 重組人 ILKAP 蛋白

EPHA7 Protein Rat 重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白

BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷

ILKAP Protein Human 重組人 ILKAP 蛋白

TNFRSF10B重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

EPHA7 Protein Rat 重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白

ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

豚鼠白三烯B4(LTB4)檢測試劑盒 ，英文名： LTB4 ELISA Kit

Two lymphoid tissue chemokine (SLC/CCL21) ELISA Kit 人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)檢測試劑盒

rabbitSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 兔子S100蛋白(S-100)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β內(nèi)啡肽受體

細菌鹽肉湯500毫升

RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔熱休克蛋白40(HSP-40)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂肪間充質(zhì)干細胞人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂蛋白α(Lp-α)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂蛋白a（Lp-a）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用