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產(chǎn)品名稱:兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品特點:兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品SERPING1 Others Human 人 SERPING1 人細(xì)胞裂解液 FZD5 Others Human 人 Frizzled-5 人細(xì)胞裂解液 MEP1A Others Mouse 小鼠 MEP1A 人細(xì)胞裂解液 BHK-21(倉鼠腎細(xì)胞)

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-12

訪問次數(shù):27

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

實驗報告:

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細(xì)胞簡介:

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細(xì)胞和間質(zhì)(結(jié)締組織、纖維、毛細(xì)血管、淋巴管)構(gòu)成,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積大、配布復(fù)雜的漿膜,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜的主要生理功能:①分泌功能;②吸收功能;③再生能力;④防御功能;⑤調(diào)理功能。臟、壁腹膜都有豐富的毛細(xì)血管,毛細(xì)血管上有不同的孔徑;腹膜的毛細(xì)血管和毛細(xì)血管后靜脈是進(jìn)行溶質(zhì)交換的主要場所。

產(chǎn)品名稱

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源

腹膜

英文名稱

Rabbit Peritoneal   Capillary Endothelial Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

實驗室分離的兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合化學(xué)試劑抑制法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。


兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

注意事項:

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)檢測試劑盒 ,英文名: CXCL16 ELISA Kit

Mouse angiogenin (ANG) ELISA Kit 小鼠血管生長素(ANG)檢測試劑盒

RatmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit 大鼠癌標(biāo)志物-CA153檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGSKELISAKit大鼠糖原合成酶激酶

細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SI1)活性比色法定量檢測試劑盒20/50

RatTumornecrosisfactorsolublereceptor,TNFsR-ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

CDH18重組食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 蛋白 Protein

IL-17(Interleukin-17 0.5mgIL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原()

IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein

HNRNPR Protein Human 重組人 HNRNPR / HNRNP-R / HNRNP R 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

ICOS Protein Mouse 重組小鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL-17(Interleukin-17 0.5mgIL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原()

HNRNPR Protein Human 重組人 HNRNPR / HNRNP-R / HNRNP R 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CDH18重組食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 蛋白 Protein

ICOS Protein Mouse 重組小鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein

小鼠FMS樣酪酸激酶3配體(Flt3L)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat P-selectin (omein) ELISA Kit 大鼠網(wǎng)膜素(omein)檢測試劑盒

Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 人促甲狀腺素釋放激素(H)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCollagen-likeBioprotein,HCBⅡ檢測試劑盒人膠原蛋白Ⅱ(HCB)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumaeceptorfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRELISAKitGFc段受體Ⅱ(FcγR/CD32)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞兔結(jié)締組織生長因子(rabbit CTGF)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

兔心肌鈣蛋白I(rabbit cTnI)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

兔心肌鈣蛋白T(rabbit c)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

兔胱抑素C(rabbit Cystatin C)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝


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