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產(chǎn)品名稱:小鼠精原干細胞
產(chǎn)品特點:小鼠精原干細胞公司正在出售的產(chǎn)品人心臟微血管內(nèi)皮細胞RNAHCMEC miRNA5 μg SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細胞瘤細胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino =
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-16
訪問次數(shù):26
小鼠精原干細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
小鼠精原干分離自睪丸組織;精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細胞,是成體內(nèi)的定向干細胞。精原干細胞的一些優(yōu)勢使其成為動物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調(diào)節(jié)機制的深入研究,精子發(fā)生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉(zhuǎn)染,異體、異種移植技術(shù)的實際應(yīng)用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi),精子發(fā)生時一個受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,精原干細胞(SSCs)一方面進行自我更新維持干細胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細胞直至后生成精子。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處,是哺乳動物精子發(fā)生的原始細胞,也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠精原干細胞 | 組織來源 | 睪丸組織 |
英文名稱 | Mouse Spermatogonial Stem Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠精原干采用先機械吹打、后消化,結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠精原干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠白介素15(IL-15)檢測試劑盒 ,英文名: IL-15 ELISA Kit
Mouse pyruvate kinase (PK) ELISA Kit 小鼠酸激酶(PK)檢測試劑盒
ELISA 小鼠抑制素B(mouse Inhibin B) 進口分裝
CLIAKitforIL-2R(MouseIerleukin-2receptor)ELISAkit小鼠白介素2受體
通用型離子(K)濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒50次
ELISAKitN-AChR大鼠型乙酰受體
CD47重組大鼠 CD47 蛋白 Protein
FoxP1(Forkhead box P1 0.5mgFoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細胞轉(zhuǎn)錄因子)抗原
MICA重組人 MICA 蛋白 Protein
CST9L Protein Human 重組人 CST9L / Testatin 蛋白 (Fc 標簽)
EPHA6 Protein Mouse 重組小鼠 EphA6 / EHK-2 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
FoxP1(Forkhead box P1 0.5mgFoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細胞轉(zhuǎn)錄因子)抗原
CST9L Protein Human 重組人 CST9L / Testatin 蛋白 (Fc 標簽)
CD47重組大鼠 CD47 蛋白 Protein
EPHA6 Protein Mouse 重組小鼠 EphA6 / EHK-2 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
MICA重組人 MICA 蛋白 Protein
小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human spleen tyrosine kinase (Syk) ELISA Kit 人脾臟酪激酶(Syk)檢測試劑盒
HumanATP-bindingcassetteanspoerA1,ABCA1ELISAKit 人腺苷三0酸結(jié)合 96T/48T 進口分裝
HumanADisiegrinAndMetalloprotease10,ADAM10檢測試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
正常男性人體肝組織S9組分(5毫克/毫升)500微升
MouseAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠精原干細胞小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗心肌抗體(AMA)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
如果你對小鼠精原干細胞感興趣,想了解更詳細的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |