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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠頸動脈血管平滑肌細胞

英文名稱：Mouse Carotid Artery Vascular Smooth Muscle Cells

組織來源：動脈

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

小鼠頸動脈平滑肌分離自頸動脈組織；頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內(nèi)動脈。前者分布至頭頂部和顏面部。后者進入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。在發(fā)生時，鰓弓中不形成鰓的下頜弓，所以，從大動脈也不分入鰓動脈和出鰓動脈。從腹大動脈的前方發(fā)出頸外動脈，頸內(nèi)動脈是通向第三鰓弓的血管延伸而形成的，但在某些魚類、有尾兩棲類和爬行類中，這一血管也將一些血液送至大動脈根。其它的高等脊椎動物的大動脈根，在第三、第四大動脈弓之間消失，所以，其第三大動脈弓形成純粹的頸動脈。在相當于第三、第四大動脈弓之間的腹行大動脈的部分稱為頸總動脈干（common co-rotid trunk）；高等脊椎動物，是由頸總動脈干分為左、右頸總動脈，然后再各分支為頸外動脈和頸內(nèi)動脈。頸動脈是將血液由心臟輸送至頭、面、頸部的大血管，是腦的主要供血血管之一，由內(nèi)膜、平滑肌層及外膜層構(gòu)成。與其相關(guān)常見疾病為頸動脈狹窄，頸動脈狹窄導致的缺血癥狀主要包括，頭暈、記憶力、定向力減退、意識障礙、黑朦、偏側(cè)面部和/或肢體麻木和/或無力、伸舌偏向、言語不利、不能聽懂別人說的話等。研究頸動脈平滑肌細胞的體外培養(yǎng)，為研究治療頸動脈狹窄提供一個細胞模型具有重要意義。

實驗室分離的小鼠頸動脈血管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的小鼠頸動脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠頸動脈血管平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠白介素12(IL-12/P40)檢測試劑盒 ，英文名： IL-12/P40 ELISA Kit

Mouse pyruvate dehydrogenase E1 (PDH E1) ELISA Kit 小鼠酸脫氫酶E1(PDH E1)檢測試劑盒

ELISA 小鼠白三烯B4(mouse LTB4)  進口分裝

CLIAKitforIL-28(humanIerleukin28)ELISAKit人白介素28

通用型酵母樣品細胞周期G1/S和G2/M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

PDGFsR-α大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α

HMGB1重組小鼠 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

白介素1受體Ⅱ(IL1R2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Receptor Type II (IL1R2)

PLEK重組人 Pleckstrin / PLEK / p47 蛋白 Protein

CSTA Protein Human 重組人 Cystatin A / CSTA 蛋白

CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標簽)

白介素1受體Ⅱ(IL1R2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Receptor Type II (IL1R2)

CSTA Protein Human 重組人 Cystatin A / CSTA 蛋白

HMGB1重組小鼠 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標簽)

PLEK重組人 Pleckstrin / PLEK / p47 蛋白 Protein

小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human smooth muscle myosin (SMM) ELISA Kit 人平滑肌肌球蛋白(SMM)檢測試劑盒

Humanheafattyacidbindingprotein,h-FABPELISAKit 人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8檢測試劑盒人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

正常男性人體肝組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit小鼠抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠頸動脈血管平滑肌細胞小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠apelin12(AP12)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用