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產(chǎn)品名稱:兔角膜內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品特點:兔角膜內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品THP-1 人單核細胞白血病細胞 COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的細胞) GREM1 Others Mouse 小鼠 Gremlin 1 / GREM1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 ROBO2 Others Human 人 ROBO2 人細胞裂解液

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-13

訪問次數(shù):25

兔角膜內(nèi)皮細胞的詳細資料:

細胞簡介:

兔角膜內(nèi)皮細胞

兔角膜內(nèi)皮分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一,而角膜內(nèi)皮細胞(CEC)在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細胞是角膜內(nèi)層的單層細胞,構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障,通過離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,維持角膜的半脫水狀態(tài),保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細胞功能出現(xiàn)紊亂,常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細胞主要功能有:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能;②角膜內(nèi)皮細胞對角膜透明性有重要作用;③角膜內(nèi)皮細胞通過Na+-K+-ATP酶活性,維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度,防止水分滲入角膜內(nèi),維持角膜實質(zhì)層相對脫水狀態(tài),維持透明性。

產(chǎn)品名稱

兔角膜內(nèi)皮細胞

組織來源

眼角膜組織

英文名稱

Rabbit Corneal   Endothelial Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

兔角膜內(nèi)皮細胞

公司實驗室分離的兔角膜內(nèi)皮采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的兔角膜內(nèi)皮經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化酶)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

兔角膜內(nèi)皮細胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

兔角膜內(nèi)皮細胞


實驗報告:

兔角膜內(nèi)皮細胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

兔角膜內(nèi)皮細胞
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔角膜內(nèi)皮細胞

線粒體呼吸鏈復(fù)合物II試劑盒(琥珀酸-輔酶Q還原酶)

蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒(測血清、組織)(紫外比色法)

超微量Ca-ATP酶測定試劑盒

超微量Ca2+Mg2+-ATP酶測定試劑盒(比色法)

小鼠肺病毒(PVM)試劑盒

Human hirudin (Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素(Hirudin)試劑盒

Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2ELISAKit 11去輕血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒 進口分裝

HumanapoproteinA5,apo-A5試劑盒人載脂蛋白A5(apo-A5)試劑盒

植物葉綠體外膜脂質(zhì)薄層色譜(TLC)分析試劑盒10

Huma-lymphoopicvirus,HTLV-ELISAKit人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒(HTLV-)試劑盒

IL21重組小鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 Protein

成纖維細胞生長因子4(FGF4)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)

SIGLEC5重組人 SIGLEC5 蛋白 Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽), Biotinylated

CD84 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD84 蛋白

成纖維細胞生長因子4(FGF4)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽), Biotinylated

IL21重組小鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 Protein

CD84 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD84 蛋白

SIGLEC5重組人 SIGLEC5 蛋白 Protein

兔角膜內(nèi)皮細胞大鼠利肽受體2(NPR2)試劑盒 ,英文名: NPR2 ELISA Kit

Mouse free thyroxine (FT4) ELISA Kit 小鼠游離甲狀腺素(FT4)試劑盒

Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforGAD-AbELISAKit大鼠谷脫羧酶自身抗體

細胞過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量試劑盒20

ratprolactin,PRLELISAKit大鼠催乳素(PRL)試劑盒

注意事項:

兔角膜內(nèi)皮細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。


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